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凝胶净化色谱的分离原理及其对载体的要求

发布时间:2022-09-06      点击次数:187
凝胶色谱法又称分子排阻色谱法,主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。

凝胶净化色谱是用溶剂作流动相,流经多孔填料(如多孔硅胶或多孔树脂)作为分离介质的液相色谱法,是液相色谱的一个分支。凝胶净化色谱仪是一款处理大分子物质以及高聚物的理想设备之一。
 
凝胶净化的分离原理:
 
一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。
大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。
小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出。
 
凝胶净化色谱仪对载体的要求有哪些?
 
1、良好的化学稳定性和热稳定性;
2、有一定的机械强度;
3、不易变形;
4、流动阻力小;
5、对试样没有吸附作用;
6、分离范围越大越好(取决于孔径分布)等;
7、载体的粒度愈小,愈均匀,堆积的愈紧密,色谱柱分离效率愈高。
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